土蒸锅内灭菌，温度达到100℃后保持10小时以上。
接种发菌料袋灭菌后冷却至30℃左右即可接种，用两头接种的方法较为简便。接种要严格无菌操作。接种后移入培养室置于床架上发菌。当袋内菌丝长至5厘米时应及时解开两头的细线并松动袋口，让少量空气透入袋内，以促进菌丝健壮生长，大约经25—30天，菌丝即可长满全袋。
覆土出耳事先要在室外透风良好、排水方便的场所搭建1.8米高的耳棚，棚内做成宽1米的畦床。发菌结束后，将塑料袋脱去，而后将菌丝棒一个紧挨一个平铺在畦面上，覆上1—2厘米厚的湿土，覆盖弓形薄膜以保湿。2—3天，菌丝开始向土中伸展。10—20天，耳芽陆续出土。这时，应揭去弓形薄膜，两头留通气口，从耳芽出现到成熟，一般为10—15天。采完头潮耳后停止喷水，覆盖弓形薄膜保湿，以利菌丝恢复生长。当第二潮耳出土时，再按上述方法管理。一般可采收3批紫木耳。
